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人趨化因子2ELISA試劑盒實驗方法

更新時間:2021-01-26      瀏覽次數(shù):1552

人趨化因子2ELISA試劑盒實驗方法

產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月
檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨elisa試劑盒等種屬
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
 


儲存及有效期:
未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。
使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
  
實驗原理:
將目標抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
精密度:                                       
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%
穩(wěn)定性:
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
友情提醒:
試劑盒使用完畢后,請妥善處理相關(guān)耗材,避免環(huán)境污染!


操作時應(yīng)注意:
A. 使用移液器加液與移液槍頭不能混用。
B. 洗板要干凈,避免交叉污染。
C. 嚴格按照試劑盒的說明書操作,反應(yīng)時間準確。
D. 請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成注意做好清潔工作。
E. 不要在測量過程中關(guān)閉電源。
F. 對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差,應(yīng)根據(jù)實際情況及時修改酶免測定試劑盒參數(shù),以達到實驗效果。
G. 使用后蓋好防塵罩。
H. 出現(xiàn)技術(shù)故障時應(yīng)及時與廠家,切勿擅自拆卸酶標儀。

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