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大鼠總膽固醇ELISA試劑盒-操作步驟

更新時間:2020-07-22      瀏覽次數(shù):1056

大鼠總膽固醇ELISA試劑盒-操作步驟

有效期:6個月

保存條件:2-8℃

 

樣本處理及要求

1.  血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mLPBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

 

需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標儀(450nm

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

 

 

實驗結果計算

所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程將樣品的OD值代入方程,計算出樣品濃度

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值大于標準品孔di一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物請避光保存。

7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 試劑盒2-8℃冷藏,保質期6個月

 

RJ19756 犬硫酸肝素(HS)ELISA試劑盒
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RJ15164 大鼠ATP結合盒轉運體A1(ABCA1)ELISA試劑盒
RJ11718 人β血小板球蛋白;β血栓環(huán)蛋白(β-TG;NAP2)ELISA試劑盒
RJ17006 小鼠沉默調節(jié)蛋白1(SIRT1)ELISA試劑盒
RJ19889 犬胰島素樣生長因子II(IGF2)ELISA試劑盒
RJ14184 人舞蹈病蛋白相互作用蛋白1(HIP1)ELISA試劑盒
RJ13184 人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒
RJ20296 雞β內酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒
RJ18774 豬游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒
RJ21224 兔神經元烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒
RJ21073 兔谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒
RJ19994 綿羊環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
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RJ17916 小鼠脂肪酸結合蛋白2(FABP2)ELISA試劑盒
RJ18995 牛催乳素(PRL)ELISA試劑盒
RJ19621 犬半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(CysC)ELISA試劑盒

 

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